PCR


Sinônimos: Polymerase Chain Reaction


PCR é um método in vitro que sintetiza seqüências específicas de DNA. Esta reação utiliza um DNA que é usado como "molde" (template em inglês) e primers, que são oligonucleotídeos (pequenas seqüências que complementam o DNA), que hibridizam com hemi-hélice do molde de DNA para que seja copiada. A copia do template é catalizada pela enzima Taq polimerase, extraída de uma bactéria que pode sobreviver em altas temperaturas denominada Thermus aquaticus. Uma série de ciclos repetitivos fazem que o template seja separado em suas hemi-hélices, os primers hibridizem com o template, a polimerase catalize a ligação de nucleotídeos para formar uma nova cópia da região de interesse do DNA. Como cada cópia produzida em um ciclo pode servir de template no próximo ciclo, a cópia do DNA ocorre de forma exponencial. Em aproximadamente 20 ciclos, a concentração de DNA aumenta aproximadamente um milhão de vezes.

 

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O conceito de amplificação do DNA pelo PCR é símples, mas seu impacto tem sido extraordinário. A primeira publicação utilizando este método surgiu em 1985. Cada ano subseqüénte o número de publicações científicas utilizando o PCR tem crescido exponencialmente. Em 1989, a revista Science elegeu o PCR "o maior desenvolvimento científico" e a Taq polimerase a molécula do ano. Em 1993, Kary Mullis, o criador deste método, recebeu o prêmio Nobel de Química.

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Após o desenvolvimento do PCR, "quantidade insuficiente de DNA" deixou de ser uma limitação em biologia molecular ou diagnóstico clínico.


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Prof. Dr. Ayush M. Amar email.gif (25189 bytes) Dr. Marcelo J. A. Amar

Centro de Investigação de Paternidade - Fundação Morad Ayush Amar